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使用過(guò)敏源試劑前怎么可以不了解這些!

日期:2022-08-12瀏覽:851次

  過(guò)敏源試劑采用親和素-生物素化過(guò)敏原抗原預(yù)包被板ELISA原理,檢測(cè)人血清/血漿中存在的針對(duì)特異性過(guò)敏原IgE抗體,配以酶標(biāo)記抗人IgE單克隆抗體作為標(biāo)記物。加入底物TMB顯色后終止反應(yīng),在450nm波長(zhǎng)測(cè)各孔O.D值,O.D值的大小與待檢抗體含量成正比。
 
  過(guò)敏源試劑主要組成成分:
 
  檢測(cè)板:包被有過(guò)敏原和生物素標(biāo)記的牛血清白蛋白(陽(yáng)性質(zhì)控,位于每條試劑條的較上端)的硝酸纖維素膜,置于塑料反應(yīng)槽中;
 
  洗脫液:(TRIS/NaCl,包含NaN3),可稀釋的清洗液;標(biāo)記有生物素的抗人IgE抗體(多抗),含NaN3;酶標(biāo)鏈霉親和素,連接有堿性磷酸酯酶的鏈霉親和素(含C4H5NOS和C4H6BrNO4);底物,BCIP/NBT(5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸鹽/氯化硝基四氮唑藍(lán))。
 
  過(guò)敏源試劑的試驗(yàn)操作:
 
  試劑盒中的所有成分必須是同一批。過(guò)期時(shí)請(qǐng)勿使用。使用前須平衡至18~30C.
 
  1.去掉尾端的白色封頭和頂端的紅蓋,讓反應(yīng)管內(nèi)的緩沖液排出。用紗布擦試細(xì)頭。
 
  2.將注射器接在反應(yīng)管的頂端,將標(biāo)本由細(xì)頭抽到注射器接頭
 
  3.將反應(yīng)管平放,在室溫下(18-30C)反應(yīng)100分鐘。
 
  4.將標(biāo)本從反應(yīng)管排出,抽出注射器的推桿,由注射器針簡(jiǎn)向反應(yīng)管內(nèi)注入1毫升(4項(xiàng)組合產(chǎn)品為0.8m)清洗液,將注射器的推桿插入并推到底,用紗布擦試細(xì)頭。
 
  5.將綠色的結(jié)合液由細(xì)頭抽到注射器的接頭處。
 
  6.將反應(yīng)管平放,在室溫下(18~30C)反應(yīng)100分鐘或16小時(shí)。
 
  7.將結(jié)合液由反應(yīng)管排出,抽出注射器的推桿。加五濉清洗液到注射器針簡(jiǎn)中,讓它流下。再在注射器針簡(jiǎn)內(nèi)注入1毫升(4項(xiàng)組合產(chǎn)晶為0.8m1)清洗液,讓它流過(guò)反應(yīng)管。將注射器的推桿插入并推到底,用紗布擦試細(xì)頭。
 
  8.在塑料燒杯中注入少量(約2毫升,4項(xiàng)組合產(chǎn)品為1.5ml)清洗液。通過(guò)反應(yīng)管將清洗液抽到注射器中。抽出注射器的推桿,讓清洗液流出。9.在注射器針簡(jiǎn)內(nèi)注入1毫升(4項(xiàng)組合產(chǎn)F品為0.8m)清洗液,讓它自然流下。重復(fù)一次。將注射器的推桿插入并推到底,用紗布擦試細(xì)頭。
 
  10.將黃色的底物/指示劑通過(guò)反應(yīng)管抽到注射器中。
 
  11.平放反應(yīng)管,強(qiáng)陽(yáng)性標(biāo)本在5分鐘內(nèi)可觀察由黃到紫的顏色變化,弱陽(yáng)性標(biāo)本在90分鐘內(nèi)觀察顏色變化。

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