鹽酸酒精分化的作用為分化掉胞漿上沾上的蘇木素，因此時(shí)間不宜長，但如果分化不夠，會(huì)造成細(xì)胞核顏色過深或（及）胞漿很難上色；分化后立即用自來水沖洗，不宜久置，否則可使全部顏色消失。返藍(lán)亦稱堿化，返藍(lán)時(shí)間偏短則著色不充分，影響染色效果，碳酸鋰每缸過500張玻片更新。

 

  操作巴氏染色液技術(shù)人員要流暢，動(dòng)作干凈利落，不可把上一缸染色液帶入下一缸，每缸交替時(shí)要甩干玻片上殘存液體。細(xì)胞漿著色不佳應(yīng)考慮的因素，如果全片內(nèi)胞漿都淡染，則需延長染色時(shí)間或更換新液。如果胞漿不分色或均為淺紅色，適當(dāng)增加染色時(shí)間能夠部分糾正不分色狀況。胞漿染成灰色或紫色是由于蘇木素染色時(shí)間過長或鹽酸酒精分化不佳，經(jīng)過褪色后重新蘇木素染色可以糾正。由于標(biāo)本的不同，同樣配方的EA染液可造成偏藍(lán)、偏綠和偏紅，對不同的標(biāo)本應(yīng)使用不同的EA染液，一般認(rèn)為：EA36和EA50較適用于婦科標(biāo)本，而EA65或改良EA較適用于非婦科標(biāo)本。

  

  巴氏染色液詳細(xì)介紹，將涂片置于95%乙醇中固定15 分鐘以上，依次浸入80%、50%乙醇中各30 秒，水洗1～2分鐘，甩干，浸入蘇木精染液中3～5分鐘，水洗1～2分鐘，甩干，浸入鹽酸酒精分化液中分化數(shù)秒，水洗1～2分鐘，甩干。浸入返藍(lán)液中數(shù)秒，水洗1～2 分鐘，甩干。置于95%乙醇中漂洗，水洗甩干。浸入橘黃G染液中染1～3分鐘；95％乙醇、95％乙醇、無水乙醇中漂洗各1次，時(shí)間各10～20秒。浸入EA36染液（或EA50染液）中染色2～5分鐘，95％乙醇、95％乙醇、無水乙醇中漂洗各1次，時(shí)間各10～20秒。浸入浸蠟脫蠟透明液中2分鐘。中性樹膠封固，鏡檢。